ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的結(jié)果判斷方法

    要完成一項(xiàng)漂亮的ELISA實(shí)驗(yàn)，不光要做足實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備，還要熟練掌握操作方法及技巧，后就是實(shí)驗(yàn)的結(jié)果了。那么ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的結(jié)果如何判斷分析呢？

1.儀器值：于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2.以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y)，相應(yīng)的IFN-Y標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X)，做得相應(yīng)的曲線(xiàn)，樣品的IFN-Y含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)換算出相應(yīng)的濃度，再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。
3.檢測(cè)值范圍：0-400pg/ml
4.敏感度：1.0pg/ml

    ELISA的試驗(yàn)結(jié)果可用肉眼觀察顏色反應(yīng)的深淺作出判斷，也可用分光光度計(jì)作測(cè)定。當(dāng)然，后者更為正確。而肉眼觀察更為簡(jiǎn)便，而且也有一定正確性。據(jù)Adler(1980)報(bào)告，目測(cè)為±1+、2+、3+、4+相當(dāng)于分光光度計(jì)測(cè)定O.D值。

    不論用哪種方法判定結(jié)果，每次都要有陽(yáng)性和陰性參考血清作對(duì)照，這樣可以消除一些外界的影響因素。
≤0.04“±”     0.06～0.092和0.08～0.25“+”
0.26～0.5“++”  0.51～1.0“+++”    > 1.0“++++”