超級干貨:如何選擇抗體

抗體(英語:antibody)，(免疫球蛋白不僅僅只是抗體)是一種由漿細胞(效應B細胞)分泌，被免疫系統用來鑒別與中和外來物質如細菌、病毒等的大型Y形蛋白質，僅被發現存在于脊椎動物的血液等體液中，及其B細胞的細胞膜表面。抗體能識別特定外來物的一個*特征，該外來目標被稱為抗原。

1. 一抗選擇

（1）確定抗體的名字，注意中英文名字、別名、亞型等信息。

（2）確定實驗樣本的種屬，Human，Mouse，Rat等。我們的抗體說明書都列出該抗體驗證過的適用物種，可根據說明書列出已驗證的種屬來選擇適合你實驗需要的抗體。

（3）確定您的實驗類型，Elisa，WB，IHC，ICC，或者是FACS。biorbyt的每種抗體說明書都會列出抗體經驗證過適用的實驗類型，如果抗體說明書沒有提及的應用類型，并不意味著該抗體不適用于此種分析應用類型，而僅是說明尚未經過此種實驗驗證。

（4）單多克隆抗體的選擇。一般單克隆抗體特異性強，但親和力相對小，檢測抗原靈敏度相對就低；而多克隆抗體特異性稍弱，但抗體的親和力強，靈敏度高，但易出現非特異性染色（可以通過封閉等避免）。

（5）樣本抗原蛋白的結構性質。了解樣本抗原蛋白的結構性質有助于選擇合適的抗體，待測樣本蛋白的結構域和樣本在提取和處理過程中是否會變性，蛋白空間構象的改變，會影響抗體的免疫親和反應。

2. 二抗選擇

（1）種屬來源。主要根據一抗種屬來源而決定二抗來源，如一抗是小鼠來源，那二抗就買抗小鼠的即可（羊、兔等均可）。

（2）標記物的選擇。有HRP、Biotin、熒光素等標記物。免疫組化，WB二抗主要選擇HRP，Biotin標記的二抗，而免疫熒光染色可按實驗需要選擇不同熒光素標記的二抗，如FITC、Cy3、PE等。
 

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